实验室制备系统费用来电咨询「在线咨询」

液相色谱的发展变化介绍

   液相色谱色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。    液相色谱的发展，涉及键合相，基于被测物质在固定相（含液体）和流动相之间的相对溶解度的差异，通过溶质在两相之间进行分配以实现分离。将固定液机械地涂渍在担体上组成固定相。化学键合固定相。这种固定相是通过化学反应把各种不同的有机基团键合到硅胶（载体）表面的游离羟基上，代替机械涂渍的液体固定相。这不仅避免了液体固定相流失的困扰，还大大改善了固定相的功能，提高了分离的选择性，化学键合色谱适用于分离几乎所有类型的化合物。

　制备液相色谱的特点

      1、制备液相色谱采用了自动进样器与全封闭样品瓶,极大地解放了人力;

　　2、使用高精度HPLC制备色谱泵,重现性良好;

　　3、使用了仪器标配ELSD检测器,可用于无紫外吸收样品检测;

　　4、使用高压梯度混合,不需要脱气机,梯度基本无滞后;

　　5、可使用5u或10u的制备色谱柱,分离效能可与分析柱等同;

　　6、制备色谱采用灯-钨灯组合光源,光谱范围覆盖190nm-900nm;

　　7、带有单色仪自校正功能,波长准确性可达0.2 nm;

　　8、带有光源自检功能,管理光源寿命,提醒及时更换;

　　9、可使用各种光程的外置式流通池,更换极为方便;

　　10、仪器支持FLASH色谱组件与中压色谱组件,使用成本更低;

　　11、检测器同时检测4个波长的色谱峰,并可以同图显示 并指导收集;

　　12、采用1200线高分辨光栅,在紫外-可见范围具有良好的分光效能。

液相色谱的操作步骤

1).首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3).正常情况下，仪器首先用***冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止)。

4).一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，重要的是仪器基线走后，方可进样测试。

5).同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

6).样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

7).关机时，先关计算机，再关液相色谱。

8).填写登记本，由负责人签字。

制备液相色谱特点和优点

高压—压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降的压为75 Kg/cm2以上。

高速—流速为0.1~10.0 ml/min。

***—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。

高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。

HPLC与经典液相色谱相比有以下优点：

速度快—通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。

分辨率高—可选择固定相和流动相以达到较好分离效果。

灵敏度高—紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。

柱子可反复使用—用一根色谱柱可分离不同的化合物。

样品量少，容易回收—样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。