***液相色谱方法***「创新通恒」

***液相色谱基线漂移的原因

（1）柱的温度波动。即使是微小的温度变化也会导致基线波动。通常影响差异检测器、电导检测器、UV检测器或其它光电类检测器的较低灵敏度。

（2）***色谱流动相不均匀流动相条件变化，引起的基线漂移大于温度变化引起的基线漂移。

（3）污染或气体循环池

（4）探测器出口堵塞。（高压导致循环水池窗口的爆裂，产生噪声基线）

（5）不正确的流量比或流量变化

（6）柱的平衡是缓慢的，特别是当移动相发生变化时。

（7）由低质量的溶剂污染、变质或制备。

（8）个样品具有较强的保留力（高K‘值）至汕头峰

（9）洗脱样品，显示基线逐渐增加。回收溶剂不使用，不推广.. 探测器未调整..

***液相色谱仪操作进样阀的问题

1、进样量的控制。

用进样阀来进样时，阀内的样品环是定量的，(一般分析型进样阀的样品环体积为20ul)，由于进样时，注射到进样阀内的样品溶液在样品环的管路中有径向的速度梯度(即管轴处比管壁处的液流速度快)。因此，要想使样品环中充满样品溶液，从而使用进样阀来准确地定量，则必须使进样量大于样品环体积的2倍。

2、进样阀的清洁问题。

如果样品环中有上次进样时样品的残留，必然会污染下次注射进的样品，为防止这种现象的发生，应按步骤操作。

3、进样阀溢流管的堵塞。

有时，进样阀的溢流管会发生堵塞现象，向进样阀内注射样品时，注射针推不动。此故障是由于溢流管的堵塞所致。堵塞的原因多半是由于溶解样品的流动相用的是盐溶液，而其中的盐在溢流管的排空端口处结晶所致。此时，可用小烧杯盛少量蒸馏水对溢流管口稍加浸泡，端口处盐的结晶就能被溶解掉，故障排除。如能在每次进样完成之后，用蒸馏水反复冲洗至溢流管中的盐分全部冲出，则可避免此故障的发生。

HPLC的各系统

概括HPLC是有五大系统构成：动力系统，进样系统，分离系统，检测系统，数据分析和记录系统构成。

其中：

动力系统：泵

进样系统：六通阀和进样针，或者自动进样器

分离系统：色谱柱

检测系统：检测器，一般有紫外检测器，荧光检测器，示差折光检测器，MS检测器等等。

记录系统：电脑工作站等

连接这些设备的都是由一根根不锈钢管或者PEEK管构成。