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液相色谱分析的流程

由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。

遇到复杂的混合物分离（极性范围比较宽）还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而HPLC改变的是流动相极性，使样品各组分在较佳条件下得以分离。

相对于气相色谱，液相的优势在哪里？

液相和气相相比的优势有很多，主要在于应用范围更广。气相只限于容易气化的低分子量物质的分析测定，对象大部分是基础化工原材料；而任何能溶解于某溶剂的物质都能用液相分析，适用对象是分子量从几十到几万的广大范围。在制药、化工、环保、食品等诸多重要领域，液相都已成为主导的分析工具。也有两者都能应用的交叉情况，但液相的制样更简单。液相色谱的出现克服了气相色谱不能直接用于难挥发、热不稳定及高分子化合物的弱点。

液相色谱仪在食品检测中的应用

　实际的食品安全检测中，液相色谱仪更加适应对沸点高、热稳定性较差、分子量较高物体的测试。

　　1、N-亚的测定

　　在腊肉等腌制食品中，生产主体经常会添加或者亚作为腌制食品的发色剂，本身并不存在严重的危害，但是如果其添加的量过大，在还原作用的影响下肉制品中会生成N-亚，而N-亚对人体的危害较大，长期摄入会导致和结等疾病。针对N-亚的传统测量方法是气相色谱法，这种方法只能对被测物体中挥发性的N-亚进行测量，测量的精度不高，而且测量过程中仅色谱测定这一环节就需要一个多小时的时间，而采用液相色谱仪全过程只需要13分钟。

　　2、多环烃和杂环芳烃的测定

　　油炸、烧烤肉制品的制作过程中常常会产生多环烃和杂环芳烃等污染物，这种污染物中包含的3,4-苯并芘、二苯并芘是典型的致癌物，使用传统的氧化铝层析柱对其含量进行测量起码需要10个小时的时间，而使用液相色谱仪整个测量过程只需要数十分钟。

　　3、芳香胺的测定

　　芳香胺是人工合成色素的主要原料，长时间大量摄入会导致对人体的代谢系统的强烈，容易诱发等疾病，由于芳香胺的添加本身是不合法的，所以对芳香胺的检测工作比较重要。通常情况下液相色谱仪测定工作会在5分钟内完成，而传统的TLC测定法则需要50分钟的时间才能完成。

***液相色谱仪原理

***液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谱的理论，把原来的流动性改变为很高压力可达到4.9′107Pa。色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成。造成的结果就是色谱柱的柱效远远高于原始的经典液相色谱。并且它柱子使用后还能具有高度灵敏度检测器。能够对流出来的分析物进行连续检测。